1, 2, 3, 4, 5 ug/mL.

The White method for MF analysis do not require calibaration curve here is the method in French:

Dosage de l’HMF du miel par la méthode de White (1979)

L'hydroxyméthylfurfural (HMF) est le produit de la déshydratation de la molécule d’hexose en milieu acide et à chaud (le furfural est l’équivalent provenant de la molécule de pentose sans la fonction CH2OH). Dans le miel il est considéré comme une preuve de sa falsification par le sirop inverti par l’acide. La teneur en HMF a été largement utilisée comme un indicateur de chauffage du miel. Il est évident que le HMF peut être dosé à des quantités appréciables dans le miel stocké à température ambiante. Les concentrations moyennes sont d'environ 5 mg/100 g. L’HMF peut être dosé par la méthode de White de 1979, dans laquelle l'absorbance UV d'une solution aqueuse clarifiée de miel est mesurée contre une solution de référence de ce même miel dans lequel le chromophore 284 nm du HMF est détruit par le bisulfite. La destruction du chromophore élimine l'absorption dans l’UV du miel. Le spectre de différence entre l'échantillon (sans bisulfite) et la référence (avec du bisulfite) ressemble étroitement à la bande d'absorption de HMF entre 250 et 330 nm (avec un maximum à 284 nm) et permet la quantification facile de la teneur en HMF en utilisant la valeur de la littérature pour la capacité d'absorption du HMF.

Rem: Utiliser uniquement des récipients en verre propres et ne pas contaminer les solutions ou utiliser la même pipette pour plusieurs réactifs.

Réactifs et appareils :

-solution de Carrez I: dissoudre 15 g de ferrocyanure de potassium [K4Fe (CN) 6.3H2O] dans l'eau et diluer à 100 ml. -la solution de Carrez II: dissoudre 30 g d'acétate de zinc [Zn (CH3CO2) 2.2H2O] dans l'eau et diluer à 100 ml. - bisulfite de sodium (NaHSO3): 0,20% dans l'eau. Préparer une solution fraîche du jour.

- spectrophotomètre UV

Technique de dosage :

Dissoudre le miel (5g pesés à 1 mg près, dans un petit bêcher) dans l'eau distillée (25 ml) et transvaser quantitativement dans une fiole jaugée de 50 ml. Ajouter 0,5 ml de solution Carrez I, mélanger, ajouter la solution Carrez II 0,5 ml, mélanger et diluer au volume avec l’eau. Une goutte d 'alcool peut être ajouté pour supprimer la mousse en surface. Filtrer à travers du papier en rejetant les 10 premiers ml du filtrat. Introduire à la pipette 5 ml de filtrat dans chacun des deux tubes à essai de 18 x 150 en mm, puis ajouter 5 ml d'eau dans l’un (échantillon) et 5 ml de bisulfite à 0,20% dans l'autre (référence ou témoin). Bien mélanger (au vortex) et mesurer l'absorption de l'échantillon contre le blanc à 284 nm et à 336 nm dans des cuves en quartz. Si l'absorption est trop élevée pour la précision (> 0,6), diluer la solution de l'échantillon si nécessaire avec de l'eau (par ex 1: 1) et la solution de référence à la même mesure avec 0,1% de NaHSO3. Multiplier les valeurs d'absorption par le facteur de dilution approprié avant calcul.

Calculs:

HMF (en mg/100 g ) = (DO284 - DO336) x 74.87

P

P = Poids de l’ échantillon de miel (g)

Factor = 126 x 100 x 1000 x 100 = 74.87

16830 x 1000

Avec 126 = PM du HMF

16830 = coeff d’absorption molaire du HMF à 284 nm