Our lab works now with Alternaria solani. Strains obtained from our colleagues were not pure (bacterial contamination), so we had to make several passages on gentamycin-containing medium. However, after this passage, the culture produce a very low number of conidia, even after stimulation with UV or cold water. At the same time, we need a large amount of conidia for our inoculation experiments.
Does anyone has this problem and how it can be solved?
Use Sabouraud Dextrose Agar with Petri dish cover embedded with filter paper soaked with 0.1℅ Potato Dextrose broth. Impregnate the filter paper with a combination of tetracycline and chloramphenicol antibiotics to inhabit bacteria contamination. Note: vary the concentration of the antibiotics, use the concentration that gives the best result. Thanks
Как вариант - пропустить через растение, потом реизолировать. Или под ультрафиолет на полчаса поставить. На следующий день смывать конидии.
Можно попробовать на стерильных семенах
С ультрафиолетом пробовали, конечно, - не помогает.
Через растения пропускать - спрошу, делали ли. В среду-то добавляли экстракт из листьев... тоже без особого успеха. Заражать растения надо в опыте - а нечем.
Мицелием можно, поцарапать поверхность, например зерен на молочной спелости. Если альтернария из колосьев выделена - можно на них, или на старых листьях, на соломе подержать. Мицелий перемешать со стерильным зерном. Фузариуму помогает
Штаммы из МГУ, были выделены с картофеля... и заражать, скорее всего, надо картофель, если только это не по гранту с химиками. Выясню.
Насчет техники заражения мне надо сначала тоже уточнить у народа, о чем идет речь - картофель или зерновые (я там непосредственно не участвую, просто мне пожаловались на проблему - мол, растим на чашках, а спороношение слабое, нет ли где в сети решения). И с какой целью... м.б. нужны именно споры или опред. концентрация - тогда мицелий может не подойти.
Alternaria solani sporulate very scarce in vitro. In carrot meal agar you may get few sporulation after a prolong incubation. I will suggest you to prepare a mass culture of this fungi in boiled sorghum or wheat or barley grain to get sufficient sporulation. You may also reinoculate on host tissue(tomato) for better sporulation.
- Badges
- Science topic
- Similar topics
- Biological Science
- Molecular Biology
- Molecular Biological Techniques