Hi.I am study on the impact of plant extracts on diabetic mice. First of all I must diabetic rats by alloxan monohydrate. In your opinion, What is the best dose of saline to dissolve alloxan?
بنظر من بهتره از آب مقطر سرد بجای سالین استفاده کنید. چند نکته در ایجاد دیابت مهمه که باید به اونها توجه داشته باشید.اول از همه وزن موش ها بهتره زیر 220 گرم باشن و اگر در دامنه 180 تا 200 باشن بهترن چون وزن های بالا به سختی دیابتی میشن و وقتی هم که دیابتی بشن مرگ ومیرشون زیاده در کل مرگ و میر موش ها در مدل ایجاد دیابت با استفاده از الوکسان بیشتر از استرپتوزوسین هست. نکته دوم اینکه حتما موش ها رو قبل از تزریق ناشتا کنید که باید در قفس های تمیز به مدت 12 ساهت یا بیشتر در شرایط ناشتا باشند.نکته بعد دوز الوکسان هست که اگر به شرایط نگهداری مادتون مطمئن بودین دوز 90 میلی گرم به ازای هر کیلو دوزخوبی هست. نکته سوم حجم تزریقه که بهتره حدود 40 تا 50 واحد انسولین (نیم سی سی) باشه حجم تزریق کمتر خوب جواب نمیده. از سرنگ های انسولین (100 واحدی) استفاده بشه تا ماده بعد از تزریق بیرون نیاد (در مورد الوکسان اگه بیرون بیاد بدن موش رنگ قرمز-صورتی بخودش میگیره) . بهتره برای هر موش دوز الوکسان جدا حساب بشه و جلوی کد هر موش از قبل دوز مورد نیازش نوشته بشه. بهتره ابتدا تعداد کم در حدود 5 تا ده تا موش رو با دوز پایین مورد تزریق قرار بدین . مثلا برای موش 200 گرمی اگر با دوز 90 تزریق رو انجام بدیم به 18 میلی گرم الوکسان نیاز داریم. حالا اگر ده تا موش داشتیم که وزن هاشون هم با هم اختلاف داشت مجموع مورد نیاز الوکسان رو در نصف تعدا د موش ها (یعنی 5 سی سی) اب مقطر سرد حل میکنیم. حالا محلولی داریم که میدونیم در هر میلی لیترش چقدر الوکسان هست. به سرعت باید محلول حاضر بشه و روی یخ تا اخرین تزریق نگهداری بشه. برای مثال فوق اگر فرضا 200 میلی گرم الوکسان رو در 5 سی سی اب مقطر حل کرده باشیم در هر سی سی( یا 100 واحد انسولین) از محلول 40 میلی گرم آلوکسان خواهیم داشت حالا برای موش 200 گرمی که 18 میلی گرم الوکسان نیازه باید 45 واحد انسولین از محلول رو تزریق کنیم. نکته خیلی مهم اینه که بین 2 تا سه ساعت بعد تزریق همچنان موش ها روناشتا نگهدارین تا الوکسان جذب بشه.اگر با این دوز جواب نگرفتین دوز های بالاتر رو امتحان کنید. اما بنظر من با دوز 90 وحتی پائینتر میتونین مدل دیابتی خوبی رو ایجاد کنید.